ノックアウト細胞株

従来のRNA干渉（RNAi）技術と比べ、ノックアウト技術では標的遺伝子の発現を完全に除去できるため、タンパク質の発現を完全に抑制したり、その機能を失わせたりすることが可能です。これにより、より明確に細胞の表現型変化を観察することができます。

一方で、ノックアウト細胞モデルの構築は工程が複雑で、実験期間も長期に及びます。特に経験の少ない研究者にとっては、3〜4か月かけても期待した効果が得られず、研究の進捗に支障をきたすケースも少なくありません。

サイヤジェン株式会社の細胞ノックアウトサービス 

Cyagenは人工知能に基づくAlphaKnockout遺伝子編集専門家システムとCRISPR Pro技術を最適化してアップグレードし、遺伝子編集効率のもっと高いSmart-CRISPR™システムを開発しました。簡単に細胞コード変更突然変異、フラグメントノックアウト、複数遺伝子ノックアウトなどのさまざまなノックアウト策略を実現し、タンパク残存発現の問題をより良く解決することができます。過去の1,000例以上のサービス経験に基づいて、我々は通常、細胞の完全なKO周期を7-12週間に制御することができて、それによってお客様がスムーズな引き続いての研究を行うことができます。

弊社の強み：

1. 多種類のノックアウト策略

お客様の遺伝子と細胞の情報によって、最適なノックアウト策略を採用し、目的遺伝子のノックアウトの成功率とタンパクの非発現効率を大幅に高めます。

2. 納期のさらなる短縮

Cyagenでは、細胞用Smart-CRISPR™遺伝子編集システムを全面的にアップグレードし、KO実験の各ステップを徹底的に最適化しました。これにより、高い成功率を維持しつつ、可能な限り短納期での提供を実現しています。

3. 納品時の詳細なデータ提供

当社では、成功したホモ接合型KO細胞株の納品に加え、お客様のご要望に応じて、ヘテロ接合型やネガティブクローンなど、複数の異なるクローンのご提供も可能です。

納品前には、無菌性検査や細胞の増殖状態確認を徹底して実施。また、実験プロトコル・検証データを含む専門的な報告書および品質検査レポートを、細胞とあわせて納品いたします。

細胞ノックアウトサービスの特長

1. 独自開発のSmart-CRISPR™技術
多様なノックアウト戦略に対応可能で、高い遺伝子編集効率と完全なタンパク質ノックアウトの実現をサポートします。

2. 専門性の高いプロジェクトマネジメント
ご依頼から24時間以内に提案書を作成し、プロジェクトの進捗状況を定期的にご報告。博士チームによる技術サポートのもと、納品時には詳細な解析レポートを提出します。

3. 厳格な品質管理体制
二重菌検査やマイコプラズマ検査など、あらゆる微生物汚染を排除。ノックアウト効果についても分子レベルで厳密に検証しています。

4. 豊富な実績と信頼
これまでに1,000件以上のプロジェクト成功実績と、200種類を超える細胞株でのノックアウト経験を有し、多数の論文で引用されています。

5. 細胞から動物までの一貫対応
細胞レベルの遺伝子発現制御や機能解析から、マウス疾患モデルの構築と表現型評価に至るまで、ワンストップで支援可能な包括的サービスをご提供します。

ノックアウト細胞の成功例の精選

細胞ノックアウト成功事例

プロジェクト名：ヒトHCT116細胞のPSME3ノックアウト（セグメントノックアウト） 

1、gRNAの設計：

gRNA部位1：ATACGCTACCTAACATGGCTGGG

gRNA部位2：CCAGCATGCAAAATACAATGGGG

2、プライマーの合成及びプラスミドの構築：

3、細胞へのトランスフェクション

最適なエレクトロポレーション条件を事前に検討した上で、エレクトロポレーション法を用いてベクターを目的の細胞へ導入します。

4、モノクローナル細胞を選別して培養する

5、PCR及び電気泳動：

同定策略の原理は以下の通りです。

6、シークエンシング：

ATAAACAGAGGATTTAAGACTTTTGTTATGTTTTAGACGC-del

1809bp--AGTGGCTAATGCCT GTAATCC CACCACTTTGGGAGGCCAA

7、クローン状態：

細胞検査結果：無菌、マイコプラズマがない

培養システム：McCoy‘s 5A+ 10% FBS + 500μg/mL Hygromycin、1:3継代